Иммуноблот HCV IgG :: Иммуноблотинг гепатит с

Назначение: набор recomLine HCV IgG предназначен для качественного определения человеческих IgG-антител к вирусу гепатита С (HCV) в образцах сыворотки или плазмы методом иммуноблота с целью подтверждения положительных или сомнительных результатов, полученных в скрининге. Анализируемые антигены: NS-3 - неструктурный белок с активностью вирусной хеликазы и протеазы, хеликаза - часть NS-3 с активностью вирусной хеликазы, NS-5-12 - часть NS5 (РНК полимераза), NS-4 – N-терминальная часть NS-4 (функции неизвестны), Core – капсидный белок, формирует основную часть нуклеокапсида. Клиническая чувствительность: 99.3%. Клиническая специфичность: 96.5%. Приложения теста: вирус гепатита C (ВГC, HCV) был обнаружен в 1988 г. в качестве основного этиологического агента-возбудителя «не А–не В» гепатита (NANB), развивающегося в 80-90% случаев посттрансфузионных гепатитов. Инкубационный период 2-26 недель (в среднем 8 недель), и, в большинстве случаев, относительно мягко протекающий острый период. Заболеванию присущи клинические проявления острого гепатита (включая классические симптомы, повышение уровня ферментов печени, например, аланинаминотрансферазы (ALT), типичные изменения микроструктуры гепатоцитов и т.д.) при продолжительном отсутствии маркеров вирусов гепатита A, В и D, вируса Эпштейна-Барр или цитомегаловируса. У пациентов, инфицированных HCV, начальная стадия может протекать как со средней тяжестью, так и бессимптомно. Однако, более чем у 80% пациентов, перенесших это заболевание, развивается хронический гепатит, а в дальнейшем возможно развитие цирроза печени, повышен риск развития гепатоцеллюлярной карциномы. 36% случае всех фульминантных гепатитов составляет ВГС, и количество выживших в этом случае меньше, чем при фульминантном ВГА или ВГВ. Число людей, инфицированных HCV, во всем мире оценивается в 170 млн. человек (в Германии уровень инфицирования 0.6% всего населения). HCV является одноцепочечным РНК-вирусом из семейства флавивирусов, который включает также вирус желтой лихорадки и вирус клещевого энцефалита. Его геном длиной в 9.5 Kb кодирует один капсидный белок (core), два мембранных белка (E1 и E2) и четыре немембранных белка (NS2 …NS5). До того, как стали доступны удобные методы определения вируса, гепатит C был причиной 80-90% не А–не В инфекционных гепатитов. Этот вирус инфицирует только человека и обычно передается через переливание крови и её продуктов, а также при гемодиализе. Одна из 3-4 тысяч порций донорской крови оказывается позитивной. Риск развития инфекции после получения зараженной порции крови около 75%. 80% новых случае в настоящее время в Германии – за счет инъекции наркотиков из общего шприца или общей иглой. Другие возможные пути заражения включают половой путь и бытовые контакты с инфицированными людьми в плохих гигиенических условиях. Также в группе риска находится медицинский персонал из-за возможного повреждения иглой. Вирус может передаваться трансплацентарно во время беременности. В 30% случаев путь передачи инфекции не удается установить. Вирус попадает в кровь непосредственно из переливаемой контаминированной крови или продуктов крови. Он попадает в печень с инфицированными макрофагами, где начинает разрушать гепатоциты. В результате развивается гепатит с некрозом гепатоцитов. Примерно в 75% случаев гепатит протекает без клинических проявлений в мягкой форме, тяжелая форма наблюдается редко. Хронический гепатит развивается у 80% инфицированных лиц. В 10-20% случаев хронического заболевания развивается цирроз печени, и у около 4% из них развивается гепатоцеллюлярная карцинома. Первым шагом лабораторной диагностики является определение специфических антител к HCV с использованием иммуноферментного метода в качестве скринингового. Затем положительные в этом методе образцы подтверждаются более специфическим методом Вестерн-блота. Высокий уровень специфичности достигается за счет разделения антигенов HCV, поэтому их реактивность оценивается раздельно. Положительные результаты антител к HCV рекомендуется также проверять ПЦР-методом определения вирусной РНК, например, методом ПЦР в реальном времени (RT/PCR). ПЦР может подтвердить или исключить персистенцию вируса, которая может влиять на клинический статус пациента. В случае отрицательного результата ПЦР в сочетании с подтвержденным положительным результатом определения антител необходимо повторить анализ RT/PCR через несколько месяцев. И только затем можно сделать относительно надежное заключение о хронизации HCV инфекции. Антитела к HCV антигенам обычно определяются только через 3-4 месяца после инфицирования. Этот промежуток времени во время инкубационного периода и очень ранней острой фазы инфекции называется «диагностическим окном». В это время очень низкая вирусная нагрузка задерживает антительный ответ. Пациенты с иммуносупрессией и новорожденные имеют искаженный антительный профиль (новорожденные за счет материнских антител). Подтверждение диагноза у этой группы пациентов возможно только за счет повторного положительного анализа ПЦР.